組培礬根繼代接種過(guò)程主要包括外植體的選取、預(yù)處理、接種操作以及后續(xù)培養(yǎng)等環(huán)節(jié)。
繼代接種是礬根組培快繁中非常關(guān)鍵的一個(gè)步驟。明確一點(diǎn),礬根的繼代接種是在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行的。外植體選取時(shí),一般選擇生長(zhǎng)健壯、無(wú)病蟲(chóng)害、處于旺盛生長(zhǎng)期的幼嫩部分,如莖尖、側(cè)芽等作為外植體。這些部位細(xì)胞分裂能力強(qiáng),容易誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織或者直接分化出不定芽。
外植體預(yù)處理方面,先用流水沖洗外植體表面半個(gè)小時(shí)左右,去除表面的灰塵和雜質(zhì)。然后將外植體放入75%的酒精溶液浸泡30 - 60秒,快速殺滅表面微生物,緊接著用無(wú)菌水沖洗3 - 4次。再把外植體放在0.1%的升汞溶液(或者1 - 2%的次氯酸鈉溶液)中消毒8 - 12分鐘,期間要輕輕晃動(dòng)容器使消毒更均勻徹底。消毒完成后同樣要用無(wú)菌水沖洗4 - 5次,盡量避免殘留的消毒劑對(duì)后續(xù)培養(yǎng)造成影響。
接種操作是整個(gè)過(guò)程中最核心的部分。 在超凈工作臺(tái)上,用無(wú)菌解剖刀或者手術(shù)剪將預(yù)處理后的外植體切成合適的小段或者小塊,保證每個(gè)外植體都帶有芽點(diǎn)。然后使用無(wú)菌鑷子夾取外植體,將其放置在已經(jīng)準(zhǔn)備好的繼代培養(yǎng)基上。接種的時(shí)候要注意擺放的方向,通常讓外植體的切口面向下,這樣有利于外植體與培養(yǎng)基充分接觸,促進(jìn)其吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)并啟動(dòng)生長(zhǎng)發(fā)育程序。而且接種數(shù)量也要合理控制,不能過(guò)于密集,以免互相擠壓影響生長(zhǎng),也不能過(guò)少導(dǎo)致空間浪費(fèi)。
接種完成之后就是后續(xù)的培養(yǎng)階段了。將接種好的培養(yǎng)瓶置于合適的培養(yǎng)環(huán)境中,溫度保持在22 - 25℃之間,光照強(qiáng)度在1500 - 2500lx,每天光照時(shí)間為12 - 16小時(shí)。隨著培養(yǎng)時(shí)間的增加,外植體會(huì)逐漸適應(yīng)新的環(huán)境并且開(kāi)始生長(zhǎng),形成愈傷組織或者長(zhǎng)出新的不定芽。當(dāng)新形成的芽長(zhǎng)到一定高度后,就可以進(jìn)行再次繼代接種或者生根培養(yǎng)等后續(xù)操作了。
品名:礬根
高度:20~40cm
特點(diǎn):耐寒性強(qiáng),四季常綠,適應(yīng)性好。
種植期:四季/視地區(qū)
適播地:排水順暢,光照充足,不挑土壤。
供應(yīng)規(guī)格:120#150#180#